Natural infection and molecular detection of Cytauxzoon felis in a free-ranging Puma concolor in the state of Goiás, Brazil / Infecção natural e detecção molecular de Cytauxzoon felis em Puma concolor de vida livre no estado de Goiás, Brasil

The puma (Puma concolor Linnaeus, 1771), the most widely distributed felid species in the Americas, can be found in all Brazilian biomes. Nevertheless, few studies have focused on hemoparasites in this species. Cytauxzoon felis, a hemoparasite that can infect domestic cats, has also been described in wild felids in Brazil. To the best of our knowledge, this study is the first to diagnose the natural infection and molecular detection of C. felis in a P. concolor in the state of Goiás. This animal presented non-regenerative anemia and inclusion suggestive of piroplasmids within red blood cells. The amplified 551 bp fragment of partial Piroplasmida 18S rRNA gene sequence was 100% identical to corresponding sequences of C. felis available in GenBank. No specific treatment for cytauxzoonosis was administered, and after rehabilitation, the animal was reintroduced into the wild. This finding provides some evidence that P. concolor may act as a natural host of the parasite. The epidemiology, vector and pathogenicity of this hemoparasite in wild and domestic cats in Brazil deserves further investigation.

O puma (Puma concolor Linnaeus, 1771) tem a maior distribuição entre os felídeos das Américas e é encontrado em todos os biomas do Brasil. No entanto, poucos estudos têm se concentrado nos hemoparasitos nesta espécie. Cytauxzoon felis, um hemoparasito que pode infectar gatos domésticos, também foi descrito em felídeos selvagens no Brasil. A saber, este estudo é o primeiro diagnóstico de infecção natural e detecção molecular de C. felis em um P. concolor do estado de Goiás. Este animal apresentou anemia arregenerativa e inclusão de piroplasmídeos nos glóbulos vermelhos. A amplificação do fragmento de 551 pb da sequência parcial do gene Piroplasmorida 18S rRNA foi 100% idêntica a sequências correspondentes de C. felis disponíveis no GenBank. Nenhum tratamento específico para citauxzoonose foi administrado e, após a reabilitação, o animal foi reintroduzido na natureza. Essa descoberta fornece algumas evidências de que P. concolor pode atuar como um hospedeiro natural do parasito. A epidemiologia, vetor e patogenicidade deste hemoparasito em gatos selvagens e domésticos no Brasil merecem uma investigação mais aprofundada.

Seroprevalence and hematological abnormalities associated with Ehrlichia canis in dogs referred to a veterinary teaching hospital in central-western Brazil / Soroprevalência e alterações hematológicas associadas com Ehrlichia canis em cães encaminhados a um hospital veterinário-escola no centro-oeste do Brasil

Ticks are significant parasites of dogs in the tropics, where tick-borne pathogens are highly prevalent, especially in areas where tick control measures are frequently neglected. This study investigated the seroprevalence and hematological abnormalities associated with Ehrlichia canis in dogs referred to a veterinary teaching hospital in Central-western Brazil. Out of 264 dogs tested for anti-Ehrlichia canis antibodies by an indirect immunofluorescence assay (IFA), 59.1% (156/264) were positive. Seropositivity was significantly associated to anemia and thrombocytopenia, alone or in combination, and to leukopenia. Conversely, there were no differences in terms of seroprevalence according to sex, breed and age. This study demonstrated that dogs referred to a veterinary teaching hospital in Central-western Brazil are highly exposed to E. canis and that seropositive dogs are more likely to present hematological abnormalities, particularly anemia, thrombocytopenia and leukopenia. To our knowledge, this is the first study on detection of anti-E. canis antibodies by means of IFA among dogs in the state of Goiás. These findings highlighted the need for increasing awareness among dog owners regarding tick control measures in Central-western Brazil, ultimately to reduce the risk of exposure to E. canis and other tick-borne pathogens.

Carrapatos são importantes parasitos de cães nos trópicos, onde patógenos transmitidos por carrapatos são altamente prevalentes, especialmente em áreas onde as medidas de controle de carrapatos são frequentemente negligenciadas. O estudo investigou a soroprevalência e as anormalidades hematológicas associadas à Ehrlichia canis em cães encaminhados para um hospital veterinário-escola no Centro-oeste do Brasil. Dos 264 cães testados para anticorpos anti-Ehrlichia canis por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), 59.1% (156/264) foram positivos. A soropositividade foi associada significativamente à anemia e trombocitopenia, isoladamente ou em combinação, e à leucopenia. Por outro lado, não houve diferenças quanto à soroprevalência segundo sexo, raça e idade. Este estudo demonstrou que cães encaminhados a um hospital veterinário-escola na região Centro-oeste do Brasil são altamente expostos à E. canis, e que cães soropositivos têm maior probabilidade de apresentar alterações hematológicas, principalmente anemia, trombocitopenia e leucopenia. Para o nosso conhecimento, este é o primeiro estudo sobre a detecção de anticorpos anti-E. canis por meio da RIFI em cães do estado de Goiás. Essas descobertas destacam a necessidade de aumentar a conscientização entre os proprietários de cães em relação às medidas de controle do carrapato no Centro-oeste do Brasil, em última análise, para reduzir o risco de exposição ao E. canis e outros patógenos transmitidos por carrapatos.

Toxoplasma gondii in cattle in Brazil: a review / Toxoplasma gondii em bovinos no Brasil: uma revisão

Abstract Toxoplasma gondii is an apicomplexan protozoan that is frequently found in both humans and animals worldwide. The aim of this review was to list important aspects of Toxoplasma gondii infection in cattle in Brazil. The frequency of occurrence of T. gondii antibodies in Brazilian cattle ranges from 1 to 89.1%, depending on the region evaluated, based on data from 1978 to 2018. However, some characteristics of T. gondii infection in cattle remain uncertain, such as the role of meat intake in transmitting the parasite to humans. Most information regarding T. gondii infection among Brazilian cattle is limited to evaluations of the frequency of occurrence of antibodies. About 70% of the diagnoses of infection in these ruminants in Brazil are made via the indirect fluorescence antibody test (IFAT). Nevertheless, little is known about the population structure of this protozoan in cattle. It is necessary to expand the studies on toxoplasmosis in cattle, in order to better understand T. gondii infection in these animals and its implications for Brazilian public health.

Resumo Toxoplasma gondii é um protozoário apicomplexa de distribuição mundial prevalente em seres humanos e animais. A presente revisão objetiva elencar aspectos de importância relacionados à infecção por Toxoplasma gondii em bovinos no Brasil. A soroprevalência de anticorpos anti-T. gondii em bovinos do rebanho brasileiro varia de 1 a 89,1%, a depender da região avaliada, baseando-se em dados disponíveis de 1978 a 2018. Todavia, algumas características da infecção por T. gondii na espécie ainda são incertos, como o papel da ingestão da carne bovina na transmissão do parasita ao homem. A maior parte das informações relativas à infecção no rebanho nacional restringem-se a estudos de soroprevalência. Cerca de 70% do diagnóstico da infecção nesses ruminantes no Brasil é realizado por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Contudo, o conhecimento acerca da estrutura populacional do protozoário em bovinos ainda é limitado. Assim, é necessário ampliar os estudos sobre a toxoplasmose em bovinos, tendo em vista uma melhor compreensão da infecção na espécie, bem como de suas implicações para saúde pública brasileira.

Occurrence of Ehrlichia canis and Hepatozoon canis and probable exposure to Rickettsia amblyommatis in dogs and cats in Natal, RN / Ocorrência de Ehrlichia canis, Hepatozoon canis e provável exposição a Rickettsia amblyommatis em cães e gatos de Natal, RN

Abstract Occurrence of infection or exposure to Ehrlichia canis, Hepatozoon canis and Rickettsia spp. was detected in feral cats living in two fragments from Atlantic rainforest, in Natal, RN, Brazil, and in dogs living around the parks. While serum samples were collected from 155 animals (53 cats living in the parks; 29 dogs living in human homes around the parks; and 73 dogs living at an animal control center - ACC), spleen samples were collected from 20 dogs that were euthanized at ACC. Serum samples were analyzed to Rickettsia spp. and E. canis antibodies using the indirect immunofluorescence assay. Seventeen of the 102 dogs (17%) had E. canis antibodies and 13% (20/155) of all dogs and cats (i.e. 3% (3/102) of the dogs and 32% (17/53) of the cats) were seropositive for Rickettsia spp. antigens. The animals were therefore been exposed to R. amblyommatis or by a very closely related genotype. Among the 20 dog spleen samples analyzed, eight were PCR positive for E. canis and two for H. canis (GenBank accession number MG772657 and MG772658, respectively). In none of the spleen samples were obtained amplicons for Babesia spp. through PCR. This study provided the first evidence that Rickettsia of the spotted fever group is circulating among dogs and cats in Natal.

Resumo A ocorrência de infecção ou exposição para Ehrlichia canis, Hepatozoon canis e Rickettsia spp. foi determinada em gatos ferais que viviam em dois fragmentos da Mata Atlântica, localizados em Natal, RN, Brasil e em cães que viviam em torno dos parques e em outras regiões da cidade. Enquanto amostras de soro foram coletadas de 155 animais (53 gatos que viviam nos parques, 29 cães com domicilio em torno dos parques e 73 cães do Centro de Controle de Animais -CCA), fragmentos de baço foram coletados de 20 cães eutanasiados no CCA. A detecção de anticorpos nas amostras de soros coletadas contra Rickettsia spp. e E. canis foi realizada pela Reação de Imunofluorescência Indireta. Dezessete dos 102 cães (17%) apresentaram anticorpos anti E. canis e 13% (20/155) de todos os cães e gatos (ou seja, 3% (3/102) dos cães e 32% (17/53) dos gatos) foram soropositivos para antígenos de Rickettsia spp. Os animais foram considerados expostos à R. amblyommatis ou a um genótipo muito relacionado. Entre as 20 amostras de baço de cães analisadas, oito foram positivas para E. canis e duas para Hepatozoon canis (números de acesso ao Genbank MG772657 e MG772658, respectivamente). Nenhuma das amostras de baço produziram amplicons de Babesia spp. na PCR. Observou-se, pela primeira vez, a circulação de Rickettsia do grupo da febre maculosa em cães e gatos em Natal, RN.

Litomosoides silvai (Nematoda: Onchocercidae) parasitizing Akodon montensis (Rodentia: Cricetidae) in the southern region of Brazil / Litomosoides silvai (Nematoda: Onchocercidae) parasitando Akodon montensis (Rodentia: Cricetidae) na região Sul do Brasil

Abstract In the present study, Litomosoides silvai parasitizing Akodon montensis in the southern region of Brazil is reported for the first time. New morphological information is provided for some structures of this nematode species, such as a flattened cephalic extremity, presence of two dorsal cephalic papillae, female tail with a constriction at its tip, "s" shaped vagina, spicules characteristic of the carinii species group and microfilaria tail constricted at the tip. This nematode was found parasitizing the thoracic cavity with a prevalence of 10% (2/20), mean intensity of 4 (6/2), mean abundance of 0.4 (8/20) and range of infection of 2-6 specimens per host, in southern Brazil. This occurrence of L. silvai in A. montensis is a new geographical record for southern Brazil, in the Upper Paraná Atlantic Forest ecoregion of the northwestern region of Rio Grande do Sul, which is part of the Atlantic Forest biome.

Resumo No presente estudo é relatado pela primeira vez Litomosoides silvai parasitando Akodon montensis coletados na região Sul do Brasil. Foram fornecidas novas informações morfológicas para algumas estruturas desta espécie de nematódeo, tais como extremidade cefálica achatada, a presença de duas papilas cefálicas dorsais, cauda das fêmeas com uma constrição na ponta da cauda, vagina em forma de "s", espículas de característica do grupo de espécies de carinii e cauda da microfilária com constrição na ponta. Este nematódeo parasitava a cavidade torácica com uma prevalência de 10% (2/20), intensidade média de 4 (8/2) e abundância média de 0,4 (8/20), e intervalo de infecção de 2-6 espécimes por hospedeiro no Sul do Brasil. A ocorrência de L. silvai em A. montensis é um novo registro geográfico, no sul do Brasil, a noroeste do estado do Rio Grande do Sul, na ecorregião da Mata Atlântica do Alto Paraná, parte do bioma da Mata Atlântica.

Ehrlichia canis and Rickettsia spp. in dogs from urban areas in Paraiba state, northeastern Brazil / Ehrlichia canis e Rickettsia spp. em cães de áreas urbanas da Paraíba, nordeste do Brasil

Abstract The aims of our study was to identify Ehrlichia canis and antibodies against Rickettsia spp. belonging to the spotted fever group (SFG) in dogs sampled from Paraiba state, northeastern Brazil. Blood and serum samples collected by convenience from dogs in urban areas of five municipalities were analyzed by real-time PCR for the detection of E. canis DNA and by immunofluorescence assay test (IFAT) for the identification of antibodies against Rickettsia rickettsii, R. felis, R. parkeri, R. amblyommii and R. rhipicephali antigens. E. canis DNA was detected in 8.9% (64/719) of the blood samples, whereas 5.63% (43/763) of the serum samples were positive for at least one of the Rickettsia antigens tested by IFAT. This study showed for the first time the occurrence of E. canis and suggested the circulation of SFG Rickettsia in dogs in the study region of Paraiba state, northeastern Brazil.

Resumo Os objetivos do nosso estudo foram identificar Ehrlichia canis e anticorpos contra Rickettsia spp. pertencentes ao Grupo da Febre Maculosa (GFM) em cães amostrados no estado da Paraíba, nordeste do Brasil. As amostras de sangue e soro, coletados por conveniência, de cães em áreas urbanas de cinco municípios foram analisadas por PCR em tempo real para a detecção de DNA de E. canis e pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para identificação de anticorpos contra Rickettsia rickettsii, R. felis, R. parkeri, R. amblyommii e R. rhipicephali. O DNA de E. canis foi detectado em 8,9% (64/719) das amostras de sangue, enquanto que 5,63% (43/763) das amostras de soro foram positivas para pelo menos um dos antígenos de Rickettsia testados por RIFI. Este estudo mostrou pela primeira vez a ocorrência de E. canis e sugere a circulação de Rickettsia do GFM em cães na região em estudo do estado da Paraíba, Nordeste do Brasil.

Negative serosurvey of Toxoplasma gondii antibodies in Golden-headed Lion Tamarin (Leontopithecus chrysomelas) from Niterói/RJ, Brazil / Pesquisa sorológica de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em Mico-leão-da-cara-dourada (Leontopithecus chrysomelas) de Niterói/RJ, Brasil

Abstract New World Nonhuman Primates are highly susceptible to clinical toxoplasmosis. Serum samples from 126 recently captured Leontopithecus chrysomelas, from an exotic and invasive population, were tested for Toxoplasma gondii antibodies by the modified agglutination test (MAT, cut-off 1:25); all were seronegative. The MAT is highly specific and is not species-specific. This is the first report of T. gondii survey in this tamarin in the wild. This result is consistent with prior reports that showed the high susceptibility of the species to infection by T. gondii usually with high mortality rates.

Resumo Primatas não humanos são extremamente susceptíveis a toxoplasmose. No presente estudo, 126 Leontopithecus chrysomelas foram capturados de uma população de vida livre, exótica e invasora, e amostras de soros foram testadas para a presença de anticorpos anti- Toxoplasma gondii pelo Teste de Aglutinação Modificado (MAT, ponto de corte 1:25). Todos os animais testados foram negativos. O MAT é um teste altamente específico e não é espécie-específico. Esse é o primeiro estudo de pesquisa por anticorpos anti- T. gondii nessa espécie em vida livre. O resultado corrobora com o conhecimento prévio sobre a susceptibilidade dessa espécie a infecção pelo parasite T. gondii.

Detecção de proteínas imunorreativas de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica / Detection of immunoreactive proteins of Rickettsia sp. Atlantic Forest strain

A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença infecciosa, transmitida por carrapatos ao homem. Uma nova riquetsiose humana foi descrita como causadora de Febre Maculosa no Estado de São Paulo, sendo denominada de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. O presente trabalho teve como objetivo detectar e identificar proteínas com potencial de estimular o sistema imune de hospedeiro mamífero, desta nova cepa descrita. Para tanto, foi realizado a extração proteica total de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. As proteínas extraídas foram fracionadas por eletroforese. As bandas proteicas foram transferidas para membranas de nitrocelulose por migração elétrica e submetidas à técnica de Western-blot, para detecção proteica. Ao todo sete proteínas imunorreativas foram detectadas. Duas proteínas apresentaram maior abundancia, com peso molecular, de 200 e 130 kDa respectivamente. Através da comparação de mapas proteômicos existentes e pelo peso molecular que estas proteínas apresentaram, sugere-se que as duas proteínas detectadas representem rOmpA (200 kDa) e rOmpB (130 kDa). As demais proteínas detectadas apresentaram menor ocorrência e peso molecular inferior a 78 kDa, podendo representar membros da família de antígenos de superfície celular (Sca - Surface cell antigen). As proteínas detectadas poderão servir como base de estudo na elaboração de métodos diagnósticos sensíveis e específicos, no desenvolvimento de vacinas, além de possibilitarem novos estudos para terapias mais eficazes.(AU)

Brazilian Spotted Fever (BSF) is an infectious disease transmitted by ticks to humans. A new human rickettsial infection was reported to cause spotted fever in the State of São Paulo and was named Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. This study aimed to detect and identify proteins with potential to stimulate the immune system of mammalian host of this new strain described. Therefore, we performed total protein extraction Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. The extracted proteins were fractionated by electrophoresis. The protein bands were transferred to nitrocellulose membrane by electrical migration and subjected to Western blot for protein detection. In all, seven immunoreactive proteins were detected. Two proteins showed higher abundance, with molecular weight of 200 and 130 kDa respectively. By comparing existing proteomic maps and the molecular weight of these proteins showed that, it is suggested that the two proteins detected representing rOmpA (200 kDa) and rOmpB (130 kDa). The other detected proteins had lower occurrence and molecular weight less than 78 kDa, which may represent members of the cell surface antigens Family (Sca - Surface cell antigen). The detected proteins may serve as a study based on the development of sensitive and specific diagnostic methods in the development of vaccines and they enable further studies to more effective therapies.(AU)

Ehrlichia canis and Rickettsia spp. in dogs from urban areas in Paraiba state, northeastern Brazil

Abstract The aims of our study was to identify Ehrlichia canis and antibodies against Rickettsia spp. belonging to the spotted fever group (SFG) in dogs sampled from Paraiba state, northeastern Brazil. Blood and serum samples collected by convenience from dogs in urban areas of five municipalities were analyzed by real-time PCR for the detection of E. canis DNA and by immunofluorescence assay test (IFAT) for the identification of antibodies against Rickettsia rickettsii, R. felis, R. parkeri, R. amblyommii and R. rhipicephali antigens. E. canis DNA was detected in 8.9% (64/719) of the blood samples, whereas 5.63% (43/763) of the serum samples were positive for at least one of the Rickettsia antigens tested by IFAT. This study showed for the first time the occurrence of E. canis and suggested the circulation of SFG Rickettsia in dogs in the study region of Paraiba state, northeastern Brazil.

Resumo Os objetivos do nosso estudo foram identificar Ehrlichia canis e anticorpos contra Rickettsia spp. pertencentes ao Grupo da Febre Maculosa (GFM) em cães amostrados no estado da Paraíba, nordeste do Brasil. As amostras de sangue e soro, coletados por conveniência, de cães em áreas urbanas de cinco municípios foram analisadas por PCR em tempo real para a detecção de DNA de E. canis e pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para identificação de anticorpos contra Rickettsia rickettsii, R. felis, R. parkeri, R. amblyommii e R. rhipicephali. O DNA de E. canis foi detectado em 8,9% (64/719) das amostras de sangue, enquanto que 5,63% (43/763) das amostras de soro foram positivas para pelo menos um dos antígenos de Rickettsia testados por RIFI. Este estudo mostrou pela primeira vez a ocorrência de E. canis e sugere a circulação de Rickettsia do GFM em cães na região em estudo do estado da Paraíba, Nordeste do Brasil.

Litomosoides silvai (Nematoda: Onchocercidae) parasitizing Akodon montensis (Rodentia: Cricetidae) in the southern region of Brazil

Abstract In the present study, Litomosoides silvai parasitizing Akodon montensis in the southern region of Brazil is reported for the first time. New morphological information is provided for some structures of this nematode species, such as a flattened cephalic extremity, presence of two dorsal cephalic papillae, female tail with a constriction at its tip, s shaped vagina, spicules characteristic of the carinii species group and microfilaria tail constricted at the tip. This nematode was found parasitizing the thoracic cavity with a prevalence of 10% (2/20), mean intensity of 4 (6/2), mean abundance of 0.4 (8/20) and range of infection of 2-6 specimens per host, in southern Brazil. This occurrence of L. silvai in A. montensis is a new geographical record for southern Brazil, in the Upper Paraná Atlantic Forest ecoregion of the northwestern region of Rio Grande do Sul, which is part of the Atlantic Forest biome.

Resumo No presente estudo é relatado pela primeira vez Litomosoides silvai parasitando Akodon montensis coletados na região Sul do Brasil. Foram fornecidas novas informações morfológicas para algumas estruturas desta espécie de nematódeo, tais como extremidade cefálica achatada, a presença de duas papilas cefálicas dorsais, cauda das fêmeas com uma constrição na ponta da cauda, vagina em forma de s, espículas de característica do grupo de espécies de carinii e cauda da microfilária com constrição na ponta. Este nematódeo parasitava a cavidade torácica com uma prevalência de 10% (2/20), intensidade média de 4 (8/2) e abundância média de 0,4 (8/20), e intervalo de infecção de 2-6 espécimes por hospedeiro no Sul do Brasil. A ocorrência de L. silvai em A. montensis é um novo registro geográfico, no sul do Brasil, a noroeste do estado do Rio Grande do Sul, na ecorregião da Mata Atlântica do Alto Paraná, parte do bioma da Mata Atlântica.

Occurrence of Ehrlichia canis and Hepatozoon canis and probable exposure to Rickettsia amblyommatis in dogs and cats in Natal, RN

Abstract Occurrence of infection or exposure to Ehrlichia canis, Hepatozoon canis and Rickettsia spp. was detected in feral cats living in two fragments from Atlantic rainforest, in Natal, RN, Brazil, and in dogs living around the parks. While serum samples were collected from 155 animals (53 cats living in the parks; 29 dogs living in human homes around the parks; and 73 dogs living at an animal control center - ACC), spleen samples were collected from 20 dogs that were euthanized at ACC. Serum samples were analyzed to Rickettsia spp. and E. canis antibodies using the indirect immunofluorescence assay. Seventeen of the 102 dogs (17%) had E. canis antibodies and 13% (20/155) of all dogs and cats (i.e. 3% (3/102) of the dogs and 32% (17/53) of the cats) were seropositive for Rickettsia spp. antigens. The animals were therefore been exposed to R. amblyommatis or by a very closely related genotype. Among the 20 dog spleen samples analyzed, eight were PCR positive for E. canis and two for H. canis (GenBank accession number MG772657 and MG772658, respectively). In none of the spleen samples were obtained amplicons for Babesia spp. through PCR. This study provided the first evidence that Rickettsia of the spotted fever group is circulating among dogs and cats in Natal.

Resumo A ocorrência de infecção ou exposição para Ehrlichia canis, Hepatozoon canis e Rickettsia spp. foi determinada em gatos ferais que viviam em dois fragmentos da Mata Atlântica, localizados em Natal, RN, Brasil e em cães que viviam em torno dos parques e em outras regiões da cidade. Enquanto amostras de soro foram coletadas de 155 animais (53 gatos que viviam nos parques, 29 cães com domicilio em torno dos parques e 73 cães do Centro de Controle de Animais -CCA), fragmentos de baço foram coletados de 20 cães eutanasiados no CCA. A detecção de anticorpos nas amostras de soros coletadas contra Rickettsia spp. e E. canis foi realizada pela Reação de Imunofluorescência Indireta. Dezessete dos 102 cães (17%) apresentaram anticorpos anti E. canis e 13% (20/155) de todos os cães e gatos (ou seja, 3% (3/102) dos cães e 32% (17/53) dos gatos) foram soropositivos para antígenos de Rickettsia spp. Os animais foram considerados expostos à R. amblyommatis ou a um genótipo muito relacionado. Entre as 20 amostras de baço de cães analisadas, oito foram positivas para E. canis e duas para Hepatozoon canis (números de acesso ao Genbank MG772657 e MG772658, respectivamente). Nenhuma das amostras de baço produziram amplicons de Babesia spp. na PCR. Observou-se, pela primeira vez, a circulação de Rickettsia do grupo da febre maculosa em cães e gatos em Natal, RN.

Diversity of ticks in the wildlife screening center of São Paulo city, Brazil / Diversidade de carrapatos no centro de triagem de animais silvestres na cidade de São Paulo, Brasil

ABSTRACT: The Wildlife Screening Center (CETAS) of the Tietê Ecological Park (PET), situated at the municipality of São Paulo, receives, treats and rehabilitates wild animals that have been dislodged from their natural environment due to different reasons. This study analyzed the ixodid fauna, and the rickettsial infection in these ticks, collected on wild animals received at the PET’s CETAS. During the period from March 2003 to November 2016, 936 ticks were collected from 96 wild animals (16 bird and 18 mammal species) that were sent to CETAS. The following 12 ixodid species were identified: Amblyomma aureolatum, Amblyomma brasiliense, Amblyomma calcaratum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma longirostre, Amblyomma ovale, Amblyomma parkeri, Amblyomma sculptum, Amblyomma varium, Haemaphysalis juxtakochi, Ixodes loricatus and Rhipicephalus microplus. From 67 tick specimens tested by the Real Time PCR for rickettsiae, none were positive. The present research records for the first time in Brazil the following association between the tick stages and hosts that have never been reported before: Amblyomma sculptum nymphs on Caprimulgus parvulus, Asio clamator, Buteo brachyurus, Coragyps atratus, Amazona aestiva and Aramus guarauna, Amblyomma dubitatum nymphs on Alouatta guariba and Sphiggurus villosus, Amblyomma aureolatum adults on Bradypus variegatus, Amblyomma longirostre larvae and nymphs on A. clamator, and nymphs on Megascops choliba and Pyroderus scutatus, besides Amblyomma parkeri nymphs on Penelope obscura and Callicebus nigrifrons, and adult on Nasua nasua.

RESUMO: O Centro de Triagem de Animais Silvestres (CETAS) do Parque Ecológico do Tietê (PET), localizado no município de São Paulo, recebe, atende e reabilita animais silvestres que vem sendo retirados do seu ambiente natural por diversas razões. Este estudo relata a diversidade de carrapatos coletados em animais silvestres recebidos no PET, assim como a pesquisa de riquétsias nestes ectoparasitas. Durante os meses de março de 2003 a novembro de 2016, foram coletados e identificados 936 carrapatos de 96 animais silvestres (16 espécies de aves e 18 de mamíferos) atendidos no CETAS. Foram identificadas 12 espécies de ixodídeos: Amblyomma aureolatum, Amblyomma brasiliense, Amblyomma calcaratum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma longirostre, Amblyomma ovale, Amblyomma parkeri, Amblyomma sculptum, Amblyomma varium, Haemaphysalis juxtakochi, Ixodes loricatus e Rhipicephalus microplus. De 67 carrapatos testados por PCR em tempo real para riquétsias, nenhum foi positivo. O presente trabalho registra pela primeira vez no Brasil as seguintes associações dos estágios de carrapatos e hospedeiros que nunca foram relatadas anteriormente: ninfas de Amblyomma sculptum em Caprimulgus parvulus, Asio clamator, Buteo brachyurus, Coragyps atratus, Amazona aestiva e Aramus guarauna, ninfas de Amblyomma dubitatum em Alouatta guariba e Sphiggurus villosus, adultos de Amblyomma aureolatum em Bradypus variegatus, larvas e ninfa de Amblyomma longirostre em A. clamator e ninfas em Megascops choliba e Pyroderus scutatus, além de ninfas de Amblyomma parkeri em Penelope obscura e Callicebus nigrifrons e adulto em Nasua nasua.

Anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) from Itu Municipality, São Paulo / Anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) do Município de Itu, São Paulo

Abstract Capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) are the largest rodents found in South America. The aim of the present study was to investigate the occurrence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in 170 free-living capybaras in a residential park area in Itu Municipality, São Paulo State, Brazil. Serum samples were tested by indirect fluorescent antibody test (IFAT) for T. gondii (IFAT ≥ 1:16) and N. caninum (IFAT ≥ 1:50). Among the 170 samples analyzed, 10% (17/170) and 0% (0/170) were seropositive for T. gondii and N. caninum, respectively. This study confirms the widespread presence of T. gondii and reinforces the role of capybaras in the life cycle of this parasite. Capybaras may not be important as intermediate hosts of N. caninum in the studied environment.

Resumo As capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) são os maiores roedores encontrados na América do Sul. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em 170 capivaras de vida livre, habitando em um condomínio fechado no Município de Itu, Estado de São Paulo, Brasil. Amostras de soro foram testadas por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para T. gondii (RIFI ≥ 1:16) e N. caninum (RIFI ≥ 1:50). Entre as 170 amostras analisadas, 10% (17/170) e 0% (0/170) foram positivas para T. gondii eN. caninum, respectivamente. O presente estudo confirma a ampla distribuição de T. gondii e reforça o papel das capivaras no ciclo biológico desse parasita. Provavelmente, as capivaras não têm um papel importante como hospedeiros intermediários de N. caninum no ambiente estudado.

Presence of anti-Toxoplasma gondii, -Neospora caninum, - Leishmania spp. and -Ehrlichia canis antibodies in free-ranging maned wolves (Chrysocyon brachyurus) in the northeastern region of the state of São Paulo, Brazil / Presença de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, -Neospora caninum, -Leishmania spp. e - Ehrlichia canis em lobos-guará (Chrysocyon brachyurus) de vida livre na Região Nordeste do Estado de São Paulo, Brasil

The maned wolf (Chrysocyon brachyurus), an inhabitant of the Brazilian savanna, is considered the largest canid of South America and is classified as a near-threatened species by the International Union for Conservation of Nature (IUNC). The purpose of this study was to investigate the presence of antibodies against Toxoplasma gondii, -Neospora caninum, - Leishmania spp., and -Ehrlichia canis in free-ranging maned wolves in the northeastern region of the state of São Paulo, Brazil. Of the 17 serum samples tested by the indirect fluorescent antibody test (IFAT), 88.2% (15/17), 17.6% (3/17) and 52.9% (9/17) showed anti-T. gondii, -Leishmania spp., and -E. canis antibodies, respectively. None of the studied maned wolves tested positive for N. caninum antibodies. Our results indicated the exposure of free-ranging maned wolves to the agents in question. The presence of industrial complexes, extensive agriculture and habitat fragmentation in the northeastern region of the state of São Paulo puts these wild animals in proximity to urban areas, possibly contributing to the transmission of diseases between wild and domestic animals and human beings.(AU)

O lobo-guará (Chrysocyon brachyurus) habita o ecossistema de Cerrado e é considerado o maior canídeo da América do Sul e uma espécie ameaçada de extinção pela "International Union for Conservation of Nature" (IUNC). O objetivo desse estudo foi investigar a presença de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, -Neospora caninum, -Leishmania spp. e -Ehrlichia canis em lobosguará da região nordeste do estado de São Paulo, Brasil. Das 17 amostras de soro testadas por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), 88,2% (15/17), 17,6% (3/17) e 52,9% (9/17) apresentaram anticorpos anti-T. gondii, - Leishmania spp. e -E. canis, respectivamente. Todos os animais testados foram soronegativos para N. caninum. Esses resultados indicam a exposição dos lobos-guará dessa região aos agentes pesquisados. A presença de um complexo industrial, agricultura extensiva e fragmentação de habitat na região nordeste do estado de São Paulo, favorece a proximidade desses animais silvestres a ambientes urbanos o que pode contribuir para a transmissão de doenças entre os animais silvestres, domésticos e o homem.(AU)

Survey of Ehrlichia canis, Babesia spp. and Hepatozoon spp. in dogs from a semiarid region of Brazil / Pesquisa de Ehrlichia canis, Babesia spp. e Hepatozoon spp. em cães de uma região semiárida do Brasil

This study assessed the occurrence of Ehrlichia spp., Babesia spp. and Hepatozoon spp. infections in 100 tick-harboring dogs from a semiarid region of the State of Paraíba, Northeastern Brazil. Blood samples and ticks were collected from the animals, and a questionnaire was submitted to dog owners to obtain general data. Blood samples were used to perform hemogram, direct blood smear and immunological and molecular hemoparasite detection. The 1,151 ticks collected were identified as Rhipicephalus sanguineus; direct smears revealed E. canis-like morulae in the monocytes of 4% (4/100) of the non-vaccinated female dogs, and 34% and 25% of the dogs tested positive for Ehrlichia canis by indirect immunofluorescence assay (IFA) and polymerase chain reaction (PCR), respectively. Blood smear examination revealed Babesia-suggestive merozoites in the erythrocytes of 2% (2/100) of the animals. Babesia vogeli was detected by PCR in ten animals (10%) and was correlated with young age (p = 0.007) and thrombocytopenia (p = 0.01). None of the animals showed Hepatozoon spp. positivity. These results indicate that E. canis is the main tick-borne canine pathogen in the study area and provide the first report of B. vogeli infection in dogs from Paraiba State.

O presente estudo avaliou a ocorrência de infecção por Ehrlichia spp., Babesia spp. e Hepatozoon spp. em 100 cães, infestados por carrapatos, oriundos de uma região semiárida do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil. Amostras de sangue e de carrapatos foram coletadas dos animais, e um questionário foi submetido aos proprietários dos cães para obter dados gerais. As amostras de sangue foram utilizadas para realização de hemograma, esfregaço sanguíneo e detecção molecular dos hemoparasitos. Os 1.151 carrapatos coletados foram identificados como Rhipicephalus sanguineus; os esfregaços sanguíneos revelaram mórulas sugestivas de E. canis em 4% (4/100) de cães fêmeas não vacinadas, e 34% e 25% dos cães foram positivos para Ehrlichia canis pela imunofluorescência indireta (IFI) e reação em cadeia pela polimerase (PCR), respectivamente. Os esfregaços sanguíneos revelaram merozoítas sugestivas de Babesia em eritrócitos de 2% (2/100) dos animais. Babesia vogeli foi detectada por PCR em dez animais (10%) e foi correlacionada com a idade jovem (p=0,007) e trombocitopenia (p=0,01). Nenhum dos animais apresentou positividade para Hepatozoon spp. Esses resultados indicam que E. canis é o principal patógeno canino transmitido por carrapato, na área estudada, e fornece o primeiro relato de infecção por B. vogeli em cães do Estado da Paraíba.

Leishmania, Babesia and Ehrlichia in urban pet dogs: co-infection or cross-reaction in serological methods?

INTRODUCTION: The present study was designed to assess the occurrence of co-infection or cross-reaction in the serological techniques used for detecting the anti-Leishmania spp., -Babesia canis vogeli and -Ehrlichia canis antibodies in urban dogs from an area endemic to these parasites. METHODS: The serum samples from dogs were tested for the Babesia canis vogeli strain Belo Horizonte antigen and Ehrlichia canis strain São Paulo by immunofluorescence antibody test (IFAT) and by anti-Leishmania immunoglobulin G (IgG) antibody detection to assess Leishmania infection. We used the following four commercial kits for canine visceral leishmaniasis: ELISA, IFAT, Dual Path Platform (DPP) (Bio Manguinhos(r)/FIOCRUZ/MS) and a rK39 RDT (Kalazar Detect Canine Rapid Test; Inbios). RESULTS : Of 96 serum samples submitted to serological assays, 4 (4.2%) were positive for Leishmania as determined by ELISA; 12 (12.5%), by IFAT; 14 (14.6%) by rK39 RDT; and 20 (20.8%), by DPP. Antibodies against Ehrlichia and Babesia were detected in 23/96 (23.9%) and 30/96 (31.2%) samples, respectively. No significant association was identified between the results of tests for detecting Babesia or Ehrlichia and those for detecting Leishmania (p-value>0.05). CONCLUSIONS: In the present study, we demonstrated co-infection with Ehrlichia or Babesia and Leishmania in dogs from Minas Gerais (Brazil); we also found that the serological tests that were used did not cross-react. .

Detection of anti: Rickettsia spp. antibodies in domestic chickens of extensive breeding in an endemic area for spotted fever in the state of Rio Grande do Sul, Brazil / Detecção de anticorpos anti: Rickettsia spp. em galinhas domésticas de criação extensiva em uma área endêmica para febre maculosa no estado do Rio Grande do Sul, Brasil

The goal of this study was to investigate anti-Rickettsia spp. antibodies in sera of domestic chickens (Gallus gallus domesticus) of extensive breeding in Cerro Largo county, considered an endemic area for spotted fever in the State of Rio Grande do Sul, Brazil. Three hundred blood samples were collected and anti-Rickettsia spp. antibodies were evaluated by indirect immunofluorescence assay (IFA) in the sera obtained. The occurrence of anti-Rickettsia spp. antibodies detected in this study was 1.33% (4/300), with endpoint titers ranging from 64 to 256 for Rickettsia rickettsiii, R. parkeri and/or R. bellii. The results suggest these domestic chickens do not participate as a reservoir and/or amplifying host in the epidemiology of spotted fever in that endemic area. The present study consists in the first serological survey in Gallus gallus domesticus to Rickettsiae-spotted fever group in Brazil.

Este estudo teve como objetivo pesquisar anticorpos anti-Rickettsia spp. em soros de galinhas domésticas (Gallus gallus domesticus) de criação extensiva, provenientes de área considerada endêmica para febre maculosa no estado do Rio Grande do Sul. Foram coletadas 300 amostras de sangue e os soros obtidos foram testados para anticorpos anti-Rickettsia spp. pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). A ocorrência de anticorpos anti-Rickettsia spp. observada foi de 1,33% (4/300), com títulos variando de 64 a 256 para Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri e/ou Rickettsia bellii. Os resultados sugerem que essas galinhas domésticas não participam como reservatório e/ou hospedeiro amplificador na epidemiologia da febre maculosa na área endêmica. O presente estudo consiste na primeira pesquisa sorológica em Gallus gallus domesticus para rickettsia do grupo da febre maculosa no Brasil.

SEROLOGICAL SURVEY OF Ehrlichia SPECIES IN DOGS, HORSES AND HUMANS: ZOONOTIC SCENERY IN A RURAL SETTLEMENT FROM SOUTHERN BRAZIL / Investigação sorológica de espécies de Ehrlichia em cães, equinos e humanos de um assentamento rural do sul do Brasil

SUMMARY The aims of this study were to determine the seroprevalence of Ehrlichia spp. and risk factors for exposure in a restricted population of dogs, horses, and humans highly exposed to tick bites in a Brazilian rural settlement using a commercial ELISA rapid test and two indirect immunofluorescent assays (IFA) with E. canis and E. chaffeensis crude antigens. Serum samples from 132 dogs, 16 horses and 100 humans were used. Fifty-six out of 132 (42.4%) dogs were seropositive for E. canis. Dogs > one year were more likely to be seropositive for E. canis than dogs ≤ one year (p = 0.0051). Ten/16 (62.5%) and 8/16 (50%) horses were seropositive by the commercial ELISA and IFA, respectively. Five out of 100 (5%) humans were seropositive for E. canis and E. chaffeensis. Rhipicephalus sanguineus (n = 291, 97.98%) on dogs and Amblyomma cajennense (n = 25, 96.15%) on horses were the most common ticks found. In conclusion, anti-Ehrlichia spp. antibodies were found in horses; however, the lack of a molecular characterization precludes any conclusion regarding the agent involved. Additionally, the higher seroprevalence of E. canis in dogs and the evidence of anti-Ehrlichia spp. antibodies in humans suggest that human cases of ehrlichiosis in Brazil might be caused by E. canis, or other closely related species. .

RESUMO Objetivou-se determinar a soroprevalência de Ehrlichia spp. e os fatores de risco associados a exposição em uma população restrita de cães, cavalos e humanos altamente expostos a picadas de carrapatos em um assentamento rural brasileiro utilizando um teste comercial de ELISA rápido e dois testes de imunofluorescência indireta (IFI) com antígenos brutos de E. canis e E. chaffeensis. Amostras de soro de 132 cães, 16 cavalos e 100 humanos foram utilizadas. Cinquenta e seis/132 (42,4%) cães foram soropositivos para E. canis. Cães > um ano apresentaram mais chance de serem soropositivos para E. canis do que cães ≤ um ano (p = 0,0051). Dez/16 (62,5%) e 8/16 (50%) cavalos foram soropositivos pelo ELISA comercial e IFI, respectivamente. Cinco/100 (5%) humanos foram soropositivos para E. canis e E. chaffeensis. Rhipicephalus sanguineus (n = 291, 97,98%) nos cães e A. cajennense (n = 25, 96,15%) nos cavalos foram os carrapatos mais encontrados. Concluindo, anticorpos anti-Ehrlichia spp. foram encontrados em cavalos; entretanto, a ausência de uma caracterização molecular impede qualquer conclusão sobre agente envolvido. Além disso, a alta soroprevalência de E. canis em cães e a evidência de anticorpos anti-Ehrlichia sp. em humanos, sugere que os casos de erliquiose humana no Brasil possam ser causados por E. canis ou outra espécie intimamente relacionada. .

Serological survey on Ehrlichia sp. among dogs in the central region of Rio Grande do Sul / Pesquisa sorológica de Ehrlichia sp. em cães da região central do Rio Grande do Sul

A serological survey on Ehrlichia canis was conducted among dogs in the central area of the state of Rio Grande do Sul, where the tick Rhipicephalus sanguineus is a common parasite of dogs. Out of a total of 316 dogs attended at the veterinary teaching hospital in the municipality of Santa Maria, only 14 (4.43%) reacted positively to E. canis antigens in the indirect immunofluorescence assay, with the following endpoint titers: 80 (three dogs), 160 (five), 320 (four), 640 (one) and 1280 (one). Like in previous studies in other regions of the state of Rio Grande do Sul, only a very small portion of the dogs in Santa Maria presented antibodies reactive to E. canis, even though canine infestations due to R. sanguineus are very common in this study region. These results contrast with other regions of Brazil, where E. canis is endemic among canine populations, with seropositivity values generally higher than 30%. Genetic differences among the R. sanguineus populations in South America might be implicated in these contrasting results.(AU)

Foi realizada uma pesquisa sorológica para Ehrlichia canis, em cães, na região central do estado do Rio Grande do Sul, onde o carrapato Rhipicephalus sanguineus é um parasita comum em cães. De um total de 316 cães atendidos no Hospital Veterinário Universitário no Município de Santa Maria, somente 14 (4,43%) reagiram positivamente para o antígeno de E. canis pela reação de imunofluorescência indireta, com os seguintes títulos finais: 80 (3 cães), 160 (5), 320 (4), 640 (1) e 1.280 (1). Semelhante aos estudos anteriores em outras regiões do estado do Rio Grande do Sul, apenas uma pequena parcela dos cães de Santa Maria apresentaram anticorpos reativos para E. canis, mesmo que as infestações caninas por R. sanguineus sejam muito comuns na região de estudo. Esses resultados contrastam com outras regiões do Brasil, nas quais E. canis é endêmica entre a população canina, com valores de soropositividade geralmente superiores a 30%. Diferenças genéticas entre as populações de R. sanguineus, na América do Sul, poderiam estar envolvidas nesses resultados contrastantes.(AU)